猪传染性胃肠炎病毒聚合酶基因反义RNA对病毒的抑制作用
文献类型: 中文期刊
第一作者: 于晓龙
作者: 于晓龙;张海峰;李一经
作者机构:
关键词: 猪传染性胃肠炎病毒;反义RNA;逆转录病毒表达载体
期刊名称: 中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2006 年 36 卷 02 期
页码: 85-88
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 通过PCR扩增出猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)聚合酶部分片段,反向插入逆转录病毒表达载体pLXSN中,用脂质体法将重组质粒plxas-pol转染PA317细胞,经抗生素G418筛选出稳定的产毒细胞克隆,分别扩大培养后,取其上清液感染小鼠成纤维细胞NIH3T3,细胞克隆产生的重组病毒效价达9.0×105CFU/mL。用高效价假病毒感染IBRS2细胞,再经抗生素G418筛选,提取细胞克隆总RNA,经RT-PCR证明plxas-pol整合入IBRS2细胞。以TGEV感染IBRS2细胞和具有抗性的IBRS2细胞所产生的细胞病变为指标,证明该反义RNA对病毒有明显抑制作用,抑制率约为80%。用2×103和4×102TCID50/mL剂量的TGEV感染时,引起细胞死亡的时间分别为21 h和27 h,与对照组相比,抗性细胞系可明显延迟因病毒感染引起细胞死亡的时间。
分类号: S858.28
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