大黄鱼微卫星标记的富集与筛选

文献类型: 中文期刊

第一作者: 郝君

作者: 郝君;孙效文;梁利群;鲁翠云

作者机构:

关键词: 大黄鱼;微卫星;磁珠;生物素

期刊名称: 中国水产科学

ISSN: 1005-8737

年卷期: 2006 年 13 卷 05 期

页码: 762-766

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据生物素与链霉亲和素的亲和原理,采用生物素-磁珠富集微卫星,与传统放射性同位素杂交法相结合,构建筛选大黄鱼的微卫星文库。用生物素-微卫星捕捉单链限制性酶切片段(含有接头和大黄鱼微卫星序列),经PCR扩增单链目的片段形成双链,然后连接至T载体上,转化感受态细胞。将移至硝酸纤维素膜的重组菌用32P标记的放射性同位素探针5′-[γ-32PATP(CA)15筛选出阳性克隆菌。测序结果发现,阳性克隆率为71.9%,105个微卫星位点。其中选取设计合成30对并筛选出22对可用引物。说明所建大黄鱼微卫星文库是一个高质量的文库,可为大黄鱼基因组结构分析、大黄鱼精密微卫星连锁图谱构建、分子进化和系统发育研究、分子标记辅助育种以及经济性状的QTL定位提供大量的微卫星标记。

分类号: S917.4

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