文献类型： 中文期刊
第一作者： 刘垠鞠
作者： 刘垠鞠;李文卉;岳龙;张念章;金启旺;秦洪涛;贾万忠;姚强;付宝权
作者机构：
关键词： 多头带绦虫;脑多头蚴病;TmAdh3;间接ELISA
期刊名称： 中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2023 年 53 卷 009 期
页码： 1082-1088
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为评价多头带绦虫TmAdh3 重组蛋白作为脑多头蚴病诊断抗原的潜力,根据多头带绦虫TmAdh3基因组序列,人工优化合成TmAdh3 基因ORF序列并连接至表达载体pGEX-4T-1,转化至大肠杆菌BL21中诱导表达,利用Western-blot分析纯化的重组蛋白的反应原性,优化检测条件,建立脑多头蚴病间接ELISA诊断方法并进行评价.结果显示,成功表达了分子质量大小为 39.0 ku的重组蛋白rTmAdh3.间接ELISA检测的最适反应条件为:5.00 μg/mL重组蛋白rTmAdh3 在 4℃包被过夜;1 ∶100 稀释血清在 37℃孵育 30 min;1 ∶10000 稀释的HRP标记的酶标二抗在 37℃孵育 45 min,底物避光显色 10 min.应用建立的方法可检测到人工感染脑多头蚴后第 3~8 周的绵羊血清;对 40 份自然感染脑多头蚴的绵羊(剖检确认脑部有包囊)血清的阳性检出率为 22.5%(9/40).与细粒棘球蚴感染绵羊血清和细粒棘球蚴Eg95 免疫绵羊血清交叉反应率为 5%(4/80).结果表明,本研究建立的以TmAdh3 重组蛋白作为检测抗原的间接ELISA诊断方法可用于绵羊脑多头蚴感染早期的筛选.
分类号： S852.734
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