核酸探针检测鸡传染性支气管炎病毒方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 莫胜兰

作者： 莫胜兰;刘惠莉;陆承平

作者机构：

关键词： 传染性支气管炎病毒;DIG探针;RT-PCR;检测;鸡

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2007 年 27 卷 02 期

页码： 168-171

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以地高辛(DIG)标记鸡传染性支气管炎病毒(IBV)pol基因的保守片段制成核酸探针,与IBV参考株、新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、禽流感病毒、正常鸡胚尿囊液及正常鸡肾组织等的RT-PCR产物进行斑点杂交,以检测探针的特异性,结果该探针仅与IBV毒株的RT-PCR产物杂交呈阳性,与对照病毒和组织的RT-PCR产物杂交呈阴性。敏感性试验显示,探针最低能检出约3.4pg的IBVRT-PCR产物。用该方法检测了38份疑似IBV临床病料,31份阳性;而用RT-PCR法扩增IBVS2基因确诊为阳性的只有29份。对人工接种IBV H52弱毒苗鸡咽喉和肛门拭子32份进行检测,检出15份阳性。结果表明,利用DIG探针检测IBV的RT-PCR产物,特异性和敏感性强,可重复,能克服RT-PCR非特异性反应和探针Northern杂交的不稳定性。

分类号： S854.43

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