鸡B淋巴细胞激活因子(ChBAFF)基因的克隆表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王步高

作者： 王步高;曾德年;覃宗华;余劲术;吴彩艳;吕敏娜;蔡建平

作者机构：

关键词： 鸡;B淋巴细胞激活因子(BAFF);基因克隆;表达

期刊名称： 广东畜牧兽医科技

ISSN： 1005-8567

年卷期： 2007 年 32 卷 03 期

页码： 29-32

摘要： 根据GenBank中收录的鸡B淋巴细胞激活因子(chicken B cell activator factor,ChBAFF)基因序列,设计特异引物,以3周龄鸡法氏囊总RNA为模板,经RT-PCR扩增出ChBAFF的ORF序列,测序后,插入质粒pMAL-c2X,构建重组表达载体,转染到大肠杆菌Rosset(DE3),并以IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表明,重组蛋白的表达量约占菌体总蛋白的25/,融合蛋白的分子量约为75ku,所表达重组蛋白主要存在于菌体裂解物上清液中,为可溶性表达。以淀粉树脂柱亲和层析纯化重组蛋白后进行SDS-PAGE,用BandScan软件分析,提纯重组蛋白的含量可达97.5/。MTT比色法分析证明,纯化的重组蛋白可显著刺激鸡脾脏淋巴细胞的活化。

分类号： S852.4

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