羊口疮病毒115基因的克隆及原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 林裕胜

作者： 林裕胜;黄丽丽;江锦秀;张靖鹏;刘维巍;刘庆华;胡奇林

作者机构：

关键词： 羊口疮病毒;115基因;克隆;原核表达

期刊名称： 福建农业学报

ISSN： 1008-0384

年卷期： 2022 年 37 卷 007 期

页码： 850-854

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]获得羊口疮病毒(ORFV)115基因表达蛋白.[方法]利用Oligo 7软件设计并筛选出115基因特异性扩增引物,以ORFV FJ-ND株基因组为模板,通过PCR技术扩增获得其基因序列,再将115基因克隆至pGEX-6p-1上,重组质粒pGEX-6p-115,并对其进行测序鉴定,鉴定正确后转化RosettaganmiB(DE3)感受态细胞,通过优化IPTG浓度和诱导时间获得重组融合蛋白最佳表达条件,用SDS-PAGE对表达的目的蛋白进行分析.[结果]115基因全长450 bp,编码149个氨基酸;115基因可以在RosettaganmiB中表达,重组蛋白分子大小约42 kDa,主要以包涵体形式表达.[结论]成功克隆了ORFV 115基因,构建了pGEX-6P-115原核表达质粒,优化了重组蛋白表达条件并进行纯化,为进一步探索ORFV 115蛋白在感染宿主过程中的机制和作用奠定基础.

分类号： S852.65

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