凡纳滨对虾过氧化物还原酶3基因的分子克隆与功能分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郭慧

作者： 郭慧;李腾;张秀霞;鲁耀鹏;张泽龙;李军涛;郑佩华;冼健安

作者机构：

关键词： 凡纳滨对虾;过氧化物还原酶（Prx）;基因克隆;脂多糖;4-壬基酚（4-NP）

期刊名称： 广东海洋大学学报

ISSN： 1673-9159

年卷期： 2023 年 002 期

页码： 18-25

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】探究凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）过氧化物还原酶3（Peroxiredoxin 3,Prx3）基因（LvPrx3）的结构特征、组织分布和抗胁迫能力，为揭示凡纳滨对虾抗环境胁迫的应答机制提供理论依据。【方法】通过RACE克隆技术取得LvPrx3基因的全长cDNA序列，应用Clustal X、EditSeq、ExPASy、MEGA 6.0、SignalP 5.0和TMHMM2.0等多个软件开展Prx3的生物信息学分析。运用半定量PCR和qRT-PCR技术检测分析LvPrx3基因在多种组织和不同胁迫条件下的表达响应情况。【结果】LvPrx3基因cDNA全长序列962 bp，内含45 bp 5′端非编码区（5′-UTR）、233 bp 3′端非编码区（3′-UTR）和684 bp开放阅读框（ORF），可编码227个氨基酸残基。LvPrx3的蛋白分子质量为25.09 ku，理论等电点（pI）为6.22，属于典型的2-Cys Prx，包含高度保守的“FYPLDFTFVCPTE”N端和“GEVCPA”C端。进化树分析显示，LvPrx3与节肢动物门的Prx亲缘关系较近，与斑节对虾（Penaeus monodon）的Prx氨基酸序列相似性最高，为98%。LvPrx3在眼柄中的表达量最高，肠道次之，在其他组织中的表达量无明显区别。脂多糖（LPS）注射后，眼柄中LvPrx3的表达分别在胁迫3 h和12～48 h时显著上调，而肠道中，LvPrx3表达量在胁迫3～24 h时均显著下调；在4-壬基酚（4-NP）胁迫后，眼柄中LvPrx3表达量在胁迫6～24 h后显著上调，24 h时最高，为对照组的4.11倍；肠道中的LvPrx3表达量在胁迫12 h时显著上调，在胁迫48 h时显著下调；以上显著性水平α均为0.05。【结论】LvPrx3基因属典型的2-Cys Prx，主要在凡纳滨对虾眼柄和肠道中高表达。脂多糖LPS刺激和4-NP胁迫可明显诱导凡纳滨对虾LvPrx3基因的表达水平，表明LvPrx3在对虾抵御病原菌感染及抗逆境胁迫的调控中发挥重要作用。

分类号： S917.4

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