表达鸭坦布苏病毒E蛋白的重组鸭瘟病毒的构建及其生物学特性
文献类型: 中文期刊
第一作者: 陈柳
作者: 陈柳;余斌;倪征;华炯钢;叶伟成;云涛;张存
作者机构:
关键词: 鸭瘟病毒;鸭坦布苏病毒;E蛋白;细菌人工染色体;重组病毒
期刊名称: 浙江农业学报
ISSN: 1004-1524
年卷期: 2015 年 27 卷 11 期
页码: 1889-1895
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为开展鸭瘟病毒-鸭坦布苏病毒二联苗的研究,将密码子优化的鸭坦布苏病毒(DTMUV)E基因插入转移载体p EP-BGH-end构建了p EP-BGH-E重组表达质粒。在鸭瘟病毒疫苗株细菌人工染色体(p DEVvac)的基础上,首先通过Red E/T两步重组法构建了EF1启动子替换GFP基因CMV启动子的p DEV-EF1突变体克隆,并将p EP-BGH-E质粒上的重组表达框p CMV-E-BGH-p A再次通过两步重组克隆至p DEV-EF1突变体的US7和US8基因之间,构建了携带有外源基因DTMUV E的突变体克隆p DEV-E。用磷酸钙法转染鸡胚成纤维细胞(CEFs)获得了重组病毒r DEV-E。病毒蚀斑大小测定结果显示,r DEV-E在CEFs上的蚀斑面积较亲本株相比稍有减少。Western blotting分析表明,外源蛋白E在病毒感染的CEFs细胞中成功表达。
分类号: S852.65
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