转拟南芥AtKup1基因高含钾量烟草获得

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郭兆奎

作者： 郭兆奎;杨谦;姚泉洪;万秀清;颜培强

作者机构：

关键词： AtKup1基因;转基因烟草;K+含量

期刊名称： 中国生物工程杂志

ISSN： 1003-3505

年卷期： 2005 年 25 卷 12 期

页码： 24-28

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 提取拟南芥幼根总RNA,进行RTPCR逆转录,产物测序,将其构建到含Km(带内含子)筛选标记的植物双元表达载体上,根癌农杆菌介导法将AtKup1基因导入烟草,对转化子进行PCR扩增、GUS染色、Southern杂交和AtKup1基因mRNA荧光定量PCR分析,并进行烟叶内在成分化验分析。PCR获得2100bp左右扩增产物,测序结果证实扩增产物序列与拟南芥AtKup1基因(GenbankNo:AF029876)一致;得到GUS染色阳性的AtKup1基因转化烟草材料29株。经PCR扩增、分子杂交检测证实AtKup1基因已整合到转基因烟草的基因组,荧光定量PCR分析可以在幼根中检测到AtKup1基因的mRNA转录。烟叶含钾量化验结果表明导入的AtKup1基因在转化材料中成功表达,使烟叶含钾量提高约45%。

分类号： S572

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