鸡传染性法氏囊病超强毒VP1基因的原核表达及兔抗血清的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 康忠惠

作者： 康忠惠;王永强;王琦;李久宽;秦立廷;高玉龙;高宏雷;祁小乐;林欢;王笑梅;许修宏

作者机构：

关键词： 鸡传染性法氏囊病超强毒;VP1;原核表达;兔抗VP1血清

期刊名称： 中国家禽

ISSN： 1004-6364

年卷期： 2011 年 33 卷 02 期

页码： 11-14

收录情况： 北大核心

摘要： 以鸡传染性法氏囊病超强毒Gx株基因组RNA为模板,通过RT-PCR扩增VP1基因,经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切处理后与经相同酶切处理的pET-30a原核表达载体连接,将酶切、PCR及测序鉴定正确的阳性重组子转化BL21(DE3)感受态细胞,融合蛋白His-VP1经IPTG诱导表达后主要以包涵体形式存在。Western blot检测到约97ku的目的蛋白能够与特异性的VP1单克隆抗体反应。将纯化的目的蛋白免疫新西兰白兔后获得了抗VP1蛋白的血清。该血清能够与重组杆状病毒rBacGxVP1感染的sf9细胞发生特异性反应,而且其ELISA抗体效价达到1∶25600。鸡传染性法氏囊病超强毒VP1基因的表达与兔抗血清的制备为病毒的检测及VP1功能的研究提供了有效工具。

分类号： S852.65

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