长角血蜱新基因HL05全长序列的克隆与原核表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 张丽艳

作者: 张丽艳;刘光远;田占成;谢俊仁;龚真莉;刘建刚

作者机构:

关键词: 长角血蜱;HL05新基因;全长;序列分析;原核表达

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2011 年 04 期

页码: 380-386

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 以兔抗长角血蜱饥饿雌蜱全蜱蛋白阳性血清为探针,对长角血蜱饥饿雌蜱cDNA表达文库进行免疫学筛选,获得一个阳性克隆HL05。经5′-RACE技术得到HL05基因的全长序列。HL05基因全长1 053bp,开放阅读框长540bp,编码179个氨基酸,预计蛋白分子质量为20.01ku。序列同源性分析表明,该基因为长角血蜱新基因。对推导的氨基酸序列进行生物信息学分析,表明HL05蛋白为分泌型蛋白,无跨膜区,具有较高的抗原指数。将该基因亚克隆后连接到原核表达载体pGEX-4T-1上,转入BL21(DE3)宿主菌,经IPTG诱导后得到大小为46ku左右的重组蛋白,与预期大小一致。Western-blot结果显示兔抗长角血蜱成蜱全虫抗体能够识别该重组蛋白。

分类号: S852.746

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