赤芝FPS基因酵母单杂交文库构建及其上游转录因子的筛选

文献类型： 中文期刊

第一作者： 徐晓兰

作者： 徐晓兰;赖荣才;陈体强;石林春;陈士林

作者机构：

关键词： 赤芝;法尼基焦磷酸合酶;酵母单杂交;转录因子;灵芝三萜

期刊名称： 中草药

ISSN： 0253-2670

年卷期： 2020 年 14 期

页码： 3770-3776

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的筛选赤芝三萜合成途径中法尼基焦磷酸合酶(farnesyl diphosphate synthase,FPS)基因的上游调控转录因子。方法首先克隆了FPS基因启动子,并连接至pAbAi质粒构建诱饵载体pAbAi-FPS。将pAbAi-FPS转化Y1H酵母感受态细胞构建诱饵菌。采用SMART技术构建赤芝酵母单杂交cDNA文库,再将纯化的双链cDNA、pGADT7-Rec共转化诱饵菌株,筛选FPS上游的转录调控因子。结果构建了含pAbAi-FPS的诱饵载体并筛选出诱饵菌株,构建了cDNA文库并转化诱饵菌株,筛选出阳性克隆37个,得到作用FPS基因上游的转录调控因子18个,包括转录因子3个、核糖体蛋白5个及其他家族蛋白10个。结论筛选出转录因子GlSNF2、GlMHR和GlZn2Cys6为调控FPS表达的候选基因,为深入研究FPS基因的表达调控机制奠定了研究基础。

分类号： S567.3

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