利用SSR快速鉴定甜菜品种纯度和真实性的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 吴则东

作者： 吴则东;王茂芊;王华忠;马龙彪

作者机构：

关键词： 甜菜;SSR标记;快速鉴定;体系优化

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2014 年 30 卷 31 期

页码： 214-218

收录情况： CSCD

摘要： 为建立一套快速鉴定甜菜品种纯度和真实性的实验体系,对DNA的提取、检测、PCR反应体系、程序、电泳以及显影方法等多个方面进行了优化,最终确立了一套简单、快速、节约、污染小的甜菜品种纯度和真实性的鉴定体系。该方法使用96孔PCR板,利用碱裂解法提取干种子(或者叶片干粉)DNA;使用无毒的Gelred替代致癌性的EB,利用λDNA检测提取样品DNA的浓度;PCR反应的体系为5μL,使用多重PCR替代单一PCR;PCR反应程序为94℃变性15 s,退火15 s,72℃延伸30 s,30个循环,最后72℃延伸5 min;PCR产物的分离使用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,最后使用快速银染法对电泳后的聚丙烯酰胺凝胶进行显影。利用优化后的程序,一位成熟的实验室操作人员只需1天就可以完成192份样品的检测。

分类号： S566.3

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