环形泰勒虫DnaJ蛋白C末端(128aa-458aa)多克隆抗体的制备与反应原性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 曹天行

作者： 曹天行;李志;史康妍;石苗;刘爱红;马全英;关贵全;李有全;殷宏;罗建勋;刘军龙

作者机构：

关键词： 环形泰勒虫;DnaJ蛋白;原核表达;多克隆抗体;反应原性分析

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2021 年 012 期

页码： 1540-1547

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获取DnaJ蛋白多克隆抗体,将截短的环形泰勒虫DnaJ蛋白C末端核酸序列构建在pET-30a（+）质粒并转化至Rosetta（DE3）感受态细胞,经终浓度1 mmol/L IPTG 37℃诱导表达,蛋白可溶性分析结果显示,该重组蛋白主要以包涵体的形式存在。SDS-PAGE结果显示,纯化后的蛋白分为2条,其中一条蛋白大小约为41.65 ku,与预期结果相符,另外一条蛋白可能因为翻译提前终止比预期条带位置偏低。将纯化后的重组蛋白与弗氏佐剂混匀乳化后,皮下分点注射BALB/c小鼠,制备小鼠源Dna J蛋白多克隆抗体。通过Western-blot验证,发现截短后的环形泰勒虫Dna J蛋白与抗His单克隆抗体、环形泰勒虫阳性血清和抗DnaJ多克隆抗体均能反应,表明该蛋白产物具有良好的反应原性。获得的多克隆抗体可用于研究环形泰勒虫DnaJ蛋白的功能。

分类号： S852.72

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