T7RNA聚合酶表达系统的真核化及其偶联表达系统的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郑海学

作者： 郑海学;靳野;尹双辉;郭慧琛;尚佑军;白兴文;刘湘涛;谢庆阁

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;IERS;T7RNA聚合酶表达系统;偶联表达系统

期刊名称： 生物工程学报

ISSN：

年卷期： 2007 年 05 期

页码： 947-952

收录情况： CSCD

摘要： 为了使T7RNA聚合酶(T7RNAP)表达系统真核化,首先,利用两种方法建立能够表达T7RNAP的真核细胞:(1)共转染表达T7RNAP的真核表达重组质粒于靶细胞;(2)利用稳定表达T7RNAP的BHK-21细胞系。然后,将FMDV内部核糖体进入位点(IRES)序列和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因定向克隆进原核载体pET-40a-c(+)的T7启动子下游,得到的重组质粒pIERS-EGFP-E。用该质粒分别转染上述两种细胞,在紫外显微镜下都能够观察到绿色荧光,表明真核化的T7RNAP偶联表达系统建立。并利用流式细胞仪对偶联表达水平进行了分析。这为利用该系统真核高效表达外源蛋白奠定了坚实的基...

分类号：

  • 相关文献

[1]T7 RNA聚合酶表达系统的真核化及其偶联表达系统的建立. 郑海学,靳野,尹双辉,郭慧琛,尚佑军,白兴文,刘湘涛,谢庆阁. 2007

[2]FMDV P1基因在重组PRV的表达及实验免疫研究. 史秋梅,高桂生,向华,李敏,宣华. 2011

[3]关于英国口蹄疫暴发污染;给全球疫苗研究、生产机构发出的重要警示——生物安全控制的“弦”必须绷紧. 宋立荣. 2008

[4]GEM技术浓缩纯化O型口蹄疫病毒灭活抗原方法的建立. 汪浩,乔绪稳,陈瑾,李图帅,张元鹏,侯继波,郑其升,孙卫东. 2018

[5]表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5和M融合蛋白的重组腺病毒的构建及其对小鼠的免疫原性. 云涛,倪征,余斌,陈柳,华炯钢,王根荣,刘光清. 2009

[6]A型口蹄疫合成肽疫苗的免疫效力评价. 唐华,刘新生,方玉珍,蒋守田,潘丽,吕建亮,张中旺,周鹏,张永光,王永录. 2013

[7]携带口蹄疫病毒B细胞表位的兔出血症病毒样颗粒的表达及其免疫原性研究. 盛蓉,宋艳华,胡波,范志宇,姜平,薛家宾,魏后军,王芳. 2015

[8]型内非编码区嵌合口蹄疫病毒的拯救及生物学特性分析. 韩成昊,李平花,白兴文,包慧芳,卢曾军,孙普,曹轶梅,刘在新. 2013

[9]口蹄疫病毒3A蛋白和FLAG标签的融合表达与血清学分析. 祁国财,曹轶梅,付元芳,厍大亮,况文东,孙普,卢曾军,刘在新. 2012

[10]利用核糖体展示技术筛选口蹄疫病毒单链抗体基因. 代鹏. 2013

[11]口蹄疫病毒非结构蛋白3AB、3A基因的克隆与原核表达. 张先锋,易忠,魏玉荣,胡尔玛西,符子华. 2010

[12]含FMDV 2A序列PRRSV GP5和M蛋白重组腺病毒的构建与鉴定. 云涛,倪征,余斌,陈柳,华炯钢,王根荣,张彦明,刘光清. 2009

[13]Asia1型口蹄疫病毒3B蛋白单克隆抗体的制备与鉴定. 刘华南,杨帆,杨华,吕律,曹伟军. 2015

[14]Asia Ⅰ型口蹄疫病毒中和表位与羊IgG重链恒定区的融合表达及免疫原性测定. 王景锋,邵军军,李菁,高闪电,独军政,丛国正,林彤,常惠芸. 2010

[15]口蹄疫病毒非结构蛋白2C基因在昆虫细胞中的表达及应用. 张小丽,卢曾军,马小军,曹轶梅,付元芳,刘在新,谢庆阁. 2011

[16]RDD基序对口蹄疫Asial型毒株感染力的影响. 郑海学,郭建宏,靳野,尚佑军,田宏,杨亚民,刘湘涛,才学鹏. 2010

[17]RGD基序邻近氨基酸突变对口蹄疫病毒O/JC/2010株毒力的影响. 况文东,白兴文,李平花,祁国财,包慧芳,卢曾军,孙普,谢宝霞,郝晓芳,刘在新. 2012

[18]猪O型口蹄疫病毒细菌样颗粒疫苗的制备与免疫原性鉴定. 侯立婷,陈瑾,乔绪稳,于晓明,侯继波,郑其升,李槿年. 2017

[19]猪圆环病毒Ⅱ型结构蛋白的二级结构及其B细胞抗原表位预测. 刘光清,倪征,云涛,梁华丽,华炯刚,李双茂,杜清云. 2005

[20]Asial型口蹄疫病毒分离株P1基因的原核表达及其多克隆抗体的制备. 张中旺,张永光,王永录,潘丽,张昱. 2009

作者其他论文 更多>>

微信小程序