猪清道夫受体SRA/CD204多克隆抗体的制备以及该受体介导的细菌吞噬功能分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 黎倩倩

作者： 黎倩倩;张彦兵;相笑;魏建超;齐鹏飞

作者机构：

关键词： 清道夫受体;重组蛋白;多克隆抗体;细菌;吞噬

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2015 年 23 卷 06 期

页码： 42-47

摘要： 针对猪SRA/CD204胞外区对应的基因片段(614~1324 bp)进行引物设计,PCR扩增获得目的片段并克隆至原核表达载体p ET-28a中,构建重组表达质粒p ET-SRA-c。利用原核表达系统获得高效表达于包涵体中的重组蛋白r SRA-c(约32 k Da),利用亲和层析技术获得纯化的r SRA-c。利用纯化的r SRA-c为免疫原,免疫Balb/c小鼠(100μg/小鼠),制备多抗血清。经Western blot结果显示,该多抗血清不仅可以识别r SRA-c,而且可以识别真核表达的全长的猪SRA/CD204(约55 k Da)。免疫荧光分析表明该多抗血清可以清楚地识别表达于CHO细胞膜上的SRA/CD204。最后,利用表达猪SRA/CD204的CHO细胞,对其介导的细菌吞噬功能进行了研究,结果表明猪SRA/CD204可以有效地介导大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的吞噬。本研究为进一步研究猪SRA/CD204在病原微生物感染中的作用奠定了基础。

分类号： S852.4

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