融合蛋白EMP-VP2在杆状病毒表达系统中的表达与免疫原性鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张欣雅

作者： 张欣雅;杨扬;田羽彤;李宗杰;李蓓蓓;刘珂;邵东华;邱亚峰;魏建超;马志永

作者机构：

关键词： 日本脑炎病毒;猪细小病毒;杆状病毒表达系统;免疫反应性;免疫原性

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2024 年 32 卷 006 期

页码： 25-35

摘要： 日本脑炎病毒（JEV）和猪细小病毒（PPV）是引起猪繁殖障碍的2种重要病原体，严重影响养猪业经济效益。本研究将日本脑炎病毒E基因上的多个B细胞及T细胞抗原表位与猪细小病毒VP2基因进行融合表达，构建pFastBac Dual-EMP-VP2载体，转化到DH10Bac感受态细胞后，通过蓝白斑筛选成功构建了rBacmid EMP-VP2重组杆粒，并在昆虫细胞Sf9中成功拯救了重组杆状病毒，实现了EMP-VP2高效表达。SDS-PAGE和Western blot分析表明，表达产物分子量与预期相符，且可以和JEV及PPV阳性血清反应，表明重组EMP-VP2蛋白具有良好的免疫反应性。表达的蛋白可以通过亲和层析成功纯化，用纯化后的EMP-VP2蛋白免疫小鼠和豚鼠，可以分别激活小鼠和豚鼠JEV和PPV特异性体液免疫反应，证明EMP-VP2蛋白具有免疫原性，为后续JEV和PPV的防控以及二联亚单位疫苗的研发奠定了基础。

分类号： S852.65

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