美洲商陆抗病毒蛋白缺失型基因PAP-C_(23)在大肠杆菌中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 夏启玉

作者： 夏启玉;肖苏生;邓柳红;易小平;张春发

作者机构：

关键词： PAP蛋白;PAP-C_(23);原核表达;包涵体;抗血清

期刊名称： 中国生物工程杂志

ISSN： 1671-8135

年卷期： 2008 年 S1 期

页码： 61-64

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的:在大肠杆菌中高效表达缺失型美洲商陆抗病毒蛋白PAP-C_(23),并制备其抗血清。方法:从成熟PAP中克隆了C端缺失23个氨基酸的基因PAP-C_(23),以PET101为表达载体构建了重组质粒,转化入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。切胶回收表达的重组蛋白,冰浴研磨后用PBS溶解,再加入等体积福氏不完全佐剂,免疫家兔,制备抗PAP蛋白的多克隆抗体。结果:SDSPAGE分析表明,目的蛋白在BL21(DE3)中获得表达,表达产物以不溶的包涵体形式存在。通过对表达条件的优化,重组蛋白的表达量可占总包涵体蛋白的29.6%。间接ELISA法测定所制备抗血清效价为1:1000,Western blot分析结果显示,该抗血清与表达的重组蛋白和天然的PAP蛋白均发生特异性的免疫反应,结论:PAP-C_(23)基因在大肠杆菌中得到了正确表达,且重组蛋白的免疫原性较好,所制备的抗血清与天然PAP发生特异性免疫反应。

分类号： S476.1`Q786

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