鸡肺表面活性蛋白A的可溶性表达及活性检测

文献类型： 中文期刊

第一作者： 黄琪

作者： 黄琪;汪凯;潘玲;祁克宗;李泽君;陈鸿军;刘红梅

作者机构：

关键词： 鸡肺表面活性蛋白A;原核表达;可溶性表达;活性检测

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2015 年 11 期

页码： 1196-1200

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用RT-PCR扩增鸡肺表面活性蛋白A(cSP-A)基因,将其连接pMD19-T Simple载体,经测序正确后,扩增成熟肽基因片段并酶切克隆入pCold-TF原核表达载体中,转化到感受态宿主菌BL21(DE3)中,加入不同浓度异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)于16℃诱导表达24h,超声波裂解,通过His·Tag纯化试剂盒纯化,分别进行SDS-PAGE检测。结果扩增得到615bp的成熟肽基因片段;SP-A蛋白获得可溶性表达,融合蛋白的大小为80ku。Western-blot结果显示,该蛋白可被特异性多克隆抗体识别。抑菌试验结果显示,与纯化的天然cSP-A蛋白不同,cSP-A原核表达产物并不具备抑菌活性。

分类号： Q51`Q78

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