马鹿布氏杆菌25kDa外膜蛋白基因的克隆、序列分析及其表达研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 乔军

作者： 乔军;才学鹏;孟庆玲;景志忠;张艳;贾桂珍

作者机构：

关键词： 马鹿布氏杆菌;25kDa外膜蛋白基因;克隆;序列分析;表达

期刊名称： 中国人兽共患病学报

ISSN： 1002-2694

年卷期： 2007 年 23 卷 02 期

页码： 128-131+135

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的克隆马鹿布氏杆菌ML分离株25kDa外膜蛋白(Omp25)基因,并在大肠杆菌中表达。方法运用RT-PCR技术从马鹿布氏杆菌分离株中扩增出Omp25基因,将其克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定和遗传变异分析,并将目的基因亚克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中诱导表达。结果该基因全长642bp,编码213个氨基酸;其中前23个氨基酸残基构成信号肽。在推导的氨基酸序列中,存在两个跨膜区,但没有潜在的N-联糖基化位点。与GenBank中已经登录的布氏杆菌其他11个分离株相比,马鹿布氏杆菌分离株Omp25基因变异较小,以散在的点突变为主,Omp25基因核苷酸和推导氨基酸序列的同源性分别为99.1%-99.4%和99.2%-99.5%之间。转化重组质粒pETOMP25的大肠杆菌BL21(DE3)在IPTG的诱导下,可表达出具有反应原性的目的蛋白,表达量占菌体蛋白的18.6%。结论马鹿布氏杆菌分离株与流产型布氏杆菌其它分离株Omp25基因同源性很高,可能是一个毒力较强的野毒株。

分类号： S852.61`S858.25

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