菊芋叶绿体分离方法比较研究
文献类型: 中文期刊
第一作者: 许盼盼
作者: 许盼盼;杨世鹏;王丽慧;孙雪梅;高洁铭;李莉;钟启文
作者机构:
关键词: 改良高盐-低pH法;叶绿体基因组提取;叶绿体分离;菊芋
期刊名称: 西北农业学报
ISSN: 1004-1389
年卷期: 2019 年 04 期
页码: 657-663
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 以菊芋叶片为材料,通过比较提取其叶绿体DNA的5种方法(改良高盐-低pH法、Percoll密度梯度离心法、GENMED试剂盒物理法、GENMED试剂盒化学法及DNaseⅠ差速离心分离法),筛选出适合菊芋叶绿体NDA的提取方法。利用显微镜、核酸蛋白测定仪、琼脂糖凝胶电泳及菊芋基因特异引物RAPD检测。结果显示:改良高盐-低pH法分离得到的叶绿体在40×物镜下其数目多,浓度高,背景清晰,提取菊芋叶片cpDNA的OD_(260)/OD_(280)为1.926,质量浓度为295.63μg/μL。经10 g/L琼脂糖凝胶电泳检测发现,cpDNA条带清晰整齐,无核DNA污染;且提取的cpDNA通过4对引物均能扩增到片段。结果表明,改良高盐-低pH法能够快速获得菊芋高质量的叶绿体DNA。
分类号: S632.9
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