大片吸虫α-微管蛋白基因的克隆表达及免疫反应性的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 岳东梅

作者： 岳东梅;王金磊;黄思扬;朱兴全;王春仁

作者机构：

关键词： 大片吸虫;α-微管蛋白基因;表达;诊断候选抗原

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2017 年 04 期

页码： 495-499

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为鉴定大片吸虫α-微管蛋白基因(FgAT),并分析其作为诊断抗原的可行性,根据肝片吸虫的基因组及转录组数据设计α-微管蛋白基因的扩增引物,以大片吸虫总RN A为模板,通过RT-PCR获得大片吸虫的FgAT基因;对其进行生物信息学分析及鉴定,然后构建pGEX-6P-1(+)-FgAT重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,再对纯化的目的蛋白进行SDS-PAGE和Western-blot分析。结果表明,大片吸虫FgAT基因的大小为1 356 bp,编码452个氨基酸残基。生物信息学分析表明,FgAT二级结构预测以无规卷曲为主,抗原表位在整个序列中均有存在。优化后的α-微管蛋白为可溶性表达,Western-blot分析结果表明其具有良好的免疫反应性。本研究首次克隆并鉴定了大片吸虫α-微管蛋白基因,表达的重组蛋白具有良好的免疫反应性,该蛋白是潜在的大片吸虫诊断靶标。

分类号： S852.7

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