UC法和exoEasy法提取鹿茸间充质干细胞外泌体的比较
文献类型: 中文期刊
第一作者: 张琦
作者: 张琦;杨春;孙胜楠;郭佳;路洪涛;刘莹;杨敏;彭英华
作者机构:
关键词: 鹿茸;间充质干细胞;外泌体;超速离心法;膜亲和法
期刊名称: 吉林农业大学学报
ISSN: 1000-5684
年卷期: 2024 年 001 期
页码: 140-147
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 经原代体外分离培养及鉴定获取鹿茸间充质干细胞(Antler mesenchymal stem cells,AMSCs),分别利用超速离心法(Ultracentrifugation,UC)和膜亲和法(exoEasy)提取AMSCs培养基上清中的外泌体(Exosomes,Exo),并比较2种方法提取AMSCs-Exo效果,以及验证AMSCs-Exo的功能。结果表明:UC法和exoEasy法均能够提取到AMSCs-Exo,UC法提取的AMSCs-Exo结构更完整,杂质较少,粒径分布具有代表性,仅有单一主峰,Western blot(WB)能检测出AMSCs-Exo标志蛋白;而exoEasy法提取的AMSCs-Exo浓度较低,结构不完整,杂质较多,并且颗粒分布分散,不具有代表性,没有单一主峰,WB无法检测到Exo标志蛋白。进一步通过5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2′-deoxyuridine assay,EdU)试验证实,AMSCs-Exo可显著促进haCat细胞增殖。通过比较2种方法提取的AMSCs-Exo可知,UC法提取的AMSCs-Exo更适合相关功能验证研究中。
分类号: S825
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