春兰基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化

文献类型: 中文期刊

第一作者: 单丽丽

作者: 单丽丽;陆瑞菊;王亦菲;陆惠丽;黄剑华

作者机构:

关键词: 春兰;RAPD;DNA;反应体系

期刊名称: 中国农学通报

ISSN: 1000-6850

年卷期: 2008 年 24 卷 01 期

页码: 68-73

收录情况: 北大核心

摘要: 以春兰为研究材料,对春兰基因组DNA的提取以及RAPD-PCR反应体系进行了优化。结果表明,在提取液中加入PVP和β-巯基乙醇去除酚类物质,采用高盐沉淀DNA和多次洗涤去除糖类,可以得到高质量春兰基因组DNA。电泳检测表明,所获得的DNA完整,无降解,完全可以满足RAPD等分子标记分析的需要。同时对春兰RAPD-PCR反应体系中各个影响因素进行了优化,建立了适合春兰RAPD分子标记的最佳反应体系,即20μl反应体系中含1UTaqDNA聚合酶,60μmol/LdNTPs,2.25mmol/LMg2+,1.0μmol/L引物,1.5ng/μl模板DNA。

分类号: S682.31

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