抗菌肽SMAP-29基因密码子优化及其在毕赤酵母中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 任耀军

作者： 任耀军;何恩鹏;王新华;薄新文

作者机构：

关键词： SMAP-29;毕赤酵母;胞内表达;抑菌活性

期刊名称： 安徽农业科学

ISSN： 0517-6611

年卷期： 2012 年 40 卷 25 期

页码： 12386-12389

收录情况： 北大核心

摘要： [目的]对抗菌肽SMAP-29的基因密码子进行优化,并使其在毕赤巴斯德酵母(Pichia pastoris)中表达。[方法]根据已知抗菌肽SMAP-29的氨基酸序列,参照毕赤巴斯德酵母密码子的偏好性,设计合成抗菌肽SMAP-29成熟肽基因片段,并同载体pPIC3.5K连接,电击转化至毕赤酵母受体菌GS115中,经G418筛选高拷贝转化子,并用MM、MD板和PCR法筛选Mut+表型。用甲醇诱导表达构建好的重组酵母表达基因工程菌,并裂解酵母细胞进行Tricine-SDS-PAGE分析。[结果]在诱导至第2天的细胞裂解液中检测到与预测的SMAP-29分子量相当,约为3.2 kD的表达带;表达产物对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌有明显的抑菌作用,而对大肠杆菌抑菌效果不明显。[结论]该研究为SMAP-29在生物医学、农业等领域中的应用奠定基础。

分类号： Q78

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