红肉火龙果果糖激酶基因HpFRK1克隆、表达与酶学活性分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 解璞
作者: 解璞;晏霜;王红林;郑乾明
作者机构:
关键词: 红肉火龙果;果糖激酶;基因克隆;表达分析;原核表达
期刊名称: 西北植物学报
ISSN: 1000-4025
年卷期: 2024 年 44 卷 010 期
页码: 1589-1596
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 【目的】克隆红肉火龙果果糖激酶基因,检测其表达和酶活性,解析其对果实发育可溶性糖积累的生理功能。【方法】从‘紫红龙’果肉克隆HpFRK1基因,进行生物信息学和亚细胞定位分析,利用qRT-PCR检测基因表达,通过大肠杆菌诱导表达获得重组蛋白并检测酶活性。【结果】HpFRK1的开放阅读框长度为993 bp,编码330个氨基酸,具有磷酸果糖激酶B家族结构域。HpFRK1与甜菜BvFRK亲缘关系最近,均属于细胞质定位的FRKs。HpFRK1在成熟茎和不同发育时期果实均表达,在花后20 d的果实表达量最高,随果实发育逐渐下调,花后30 d(果实成熟)表达量最低。亚细胞定位检测表明HpFRK1主要定位于细胞核和细胞质。诱导获得的HpFRK1重组蛋白特异性催化果糖磷酸化(Km为11.01 mmol/L)。【结论】HpFRK1在细胞质特异性催化果糖磷酸化,在红肉火龙果果实发育期间负调控果实可溶性糖积累。
分类号: S667.9
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