水貂肠炎病毒VP2基因的原核表达及多克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 卞赛赛

作者： 卞赛赛;梁琳;高窦;周灵;李沛然

作者机构：

关键词： 水貂肠炎病毒;VP2;原核表达;抗血清

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2017 年 05 期

页码： 597-602

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用原核表达系统表达水貂肠炎细小病毒(MEV)VP2衣壳蛋白,以制备抗VP2超免疫血清。根据VP2的基因序列,设计1对特异性引物,以MEV全基因组重组质粒p B-MEV-L为模板,利用PCR技术扩增出MEV VP2片段,并定向克隆到pET-32a载体中,经酶切与序列测定,证明成功构建了VP2基因原核表达质粒pET-MEV-VP2。将其转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后实现了高效表达。免疫印迹试验表明,获得的重组蛋白具有较好的反应原性。以该蛋白为免疫原免疫新西兰兔,制备抗血清,四免后用ELISA方法检测其效价达到1∶1 024。免疫荧光试验证明,获得的抗体具有良好的结合活性。为MEV的病原生物学研究奠定基础。

分类号： S852.659.2

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