荧光定量PCR检测牛乳中金黄色葡萄球菌肠毒素A基因方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 唐吉思

作者： 唐吉思;布日额;吴金花;孙立杰;薛晓阳;刘洋;丁铲

作者机构：

关键词： 牛乳;金黄色葡萄球菌;肠毒素A;荧光定量PCR

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2012 年 34 卷 01 期

页码： 56-59

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立检测牛乳中金黄色葡萄球菌(S.aureus)肠毒素A基因(SEA)定性定量的检测方法,本研究针对S.aureus SEA基因片段设计1对引物,将构建的重组质粒作为阳性对照,建立了S.aureus SEA DNA的SYBR GreenⅠreal-time PCR检测方法。结果显示,特异性产物Tm值为78.2℃～78.5℃,最低可检测到49.5 fg/μL(16.5拷贝)的阳性质粒。标准曲线的相关系数为0.99。与其他常见的产SEB的S.aureus、产SEC的S.aureus、无乳链球菌、大肠杆菌、嗜热链球菌、伤寒沙门氏菌、大肠杆菌DH5α及JM109均无交叉反应。该检测方法具有较好的特异性和敏感性,为牛乳中S.aureus的快速检测提供了新的技术手段。

分类号： R450

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