口疮病毒GIF蛋白的原核表达及对小鼠免疫细胞的影响

文献类型： 中文期刊

第一作者： 冯倩

作者： 冯倩;吴锦艳;李玲霞;杜国玉;尚佑军;刘湘涛;刘永生

作者机构：

关键词： 口疮病毒;GIF蛋白;纯化;树突状细胞

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2019 年 49 卷 010 期

页码： 1222-1232

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 探究口疮病毒GIF蛋白对小鼠骨髓源树突状细胞成熟及Na(i)ve CD4+T细胞极化作用的影响.原核表达口疮病毒GIF蛋白,用纯化后的蛋白刺激小鼠树突状细胞,利用流式细胞术检测细胞表面分子的表达情况,ELISA方法检测细胞培养上清中细胞因子IL-12P40、TNF-α、IL-10、IL-1β的分泌情况.将Na(i)veCD4+T细胞与经不同质量浓度的GIF蛋白刺激后的树突状细胞共培养,用ELISA检测该树突状细胞对Na(i)veCD4+T细胞的免疫刺激能力,并进一步检测培养上清中IFN-γ和IL-5的分泌水平.结果 显示,成功克隆了ORFV117基因,表达了羊口疮病毒GIF蛋白.经不同质量浓度蛋白刺激后,树突状细胞的表面共刺激分子CD86、CD40的表达水平均明显升高,其中5 pg/mL蛋白刺激后,MHC Ⅱ表达水平显著升高,IL-12P40、TNF-α、IL-1β、IL-10释放水平显著升高.经不同质量浓度的GIF重组蛋白刺激后的树突状细胞对Na(i)veCD4+T细胞的刺激能力增强,淋巴细胞共培养上清中IFN-γ分泌量显著增加.这表明一定质量浓度的口疮病毒GIF蛋白能促进小鼠骨髓源树突状细胞的成熟,能够激活抗原递呈作用,并且具有刺激T细胞分化的能力.

分类号： S852.659.1

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