猪核糖核酸酶L基因真核表达载体的构建与表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 周明明

作者： 周明明;王加才;姜宁朋;丛晓燕;陈蕾;吴家强;李俊;杜以军;王金宝

作者机构：

关键词： 猪;核糖核酸酶L;抗病毒;先天性免疫

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2016 年 48 卷 08 期

页码： 69-72

收录情况： 北大核心

摘要： 为了研究猪核糖核酸酶L(sRNase L)的抗病毒能力,利用pXJ41载体构建猪RNase L基因真核表达载体pXJ41-sRNase L,采用poly(I∶C)转染PK-15细胞刺激诱导sRNase L基因转录mRNA;根据Gen Bank上sRNase L基因编码区序列设计引物并加入真核表达增强序列Kozak序列,通过RT-PCR扩增sRNase L编码基因序列,并将其克隆至真核表达载体pXJ41,通过双酶切和测序鉴定重组质粒;将重组表达载体pXJ41-sRNase L转染Marc-145细胞,Western blot检测sRNase L在Marc-145细胞中表达。结果显示:成功扩增得到sRNase L基因全长;成功克隆至真核表达载体pXJ41并能够在Marc-145细胞中成功表达。结果表明:成功构建了真核表达载体pXJ41-sRNase L并在Marc-145细胞中实现了sRNase L的表达,为进一步研究sRNase L在猪体内先天性免疫中抗病毒能力及其机制提供了条件。

分类号： S828

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