一种快速高效构建植物表达载体的方法

文献类型： 中文期刊

第一作者： 韩凯

作者： 韩凯;翁建峰;郝转芳;李新海;李明顺;张德贵;白丽;张世煌;薛吉全;谢传晓

作者机构：

关键词： 表达载体;同源序列;DNA重组

期刊名称： 玉米科学

ISSN： 1005-0906

年卷期： 2012 年 20 卷 01 期

页码： 61-66

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 植物表达载体是将目的基因转化宿主细胞的媒介,载体构建是通过遗传转化方法开展基因功能鉴定与应用等研究的重要环节。以构建玉米谷氨酰胺合成酶基因(GS1)表达载体pCUbi1390-Ubi-GS1-35S-EPSPS为例,研究简单、通用、高效的构建载体的方法。该方法目的片段和载体不需要酶切产生互补的黏性末端,只需通过在目的基因PCR上下游引物的5’端设计与线性载体两端有15个碱基的同源序列,根据序列的同源性,将目的基因插入载体中,通过PCR程序实现DNA重组。结果表明,正确构建了设计的转化载体,该方法大大简化了载体构建的过程,也适用于任何一个基于单酶切位点把外源DNA重组插入目标序列。

分类号： S513`Q943.2

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