基于P18蛋白基因的新型鸭呼肠孤病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 沈丽雅

作者： 沈丽雅;潘群兴;卢凤英;董永毅;张敬峰;吴坤;刘青涛;姜平;张小飞

作者机构：

关键词： 新型鸭呼肠孤病毒;P18蛋白基因;荧光定量RT-PCR

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2021 年 006 期

页码： 1481-1487

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据新型鸭呼肠孤病毒（Novel duck reovirus, NDRV）特有的非结构蛋白P18基因保守序列设计1对特异性引物,建立了NDRV荧光定量RT-PCR检测方法。用该方法和普通RT-PCR方法对239份临床样品进行检测,NDRV阳性检出率分别为23.85%（57/239）和17.57%（42/239）,荧光定量RT-PCR检测方法的检出率明显高于普通RT-PCR检测方法。随机取5份荧光定量RT-PCR检测方法检测的阳性的样品用鸭胚进行病毒分离培养,经普通RT-PCR扩增和基因测序证明均为NDRV。用103.0ELD50剂量的NDRV-SY株人工感染14日龄雏鸭,不同时间采集泄殖腔肛拭子样品,通过荧光定量RT-PCR检测方法进行排毒情况监测,结果显示,雏鸭人工感染NDRV 48 h时可以从泄殖腔检测到病毒排出,持续时间可达20 d,并发现在病毒感染后的第5 d和第10 d出现2次排毒高峰。试验结果表明,建立的NDRV荧光定量RT-PCR检测方法具有良好的特异性和较高的敏感性,可用于NDRV感染的排毒监测以及临床感染的早期诊断和流行病学调查。

分类号： S852.65

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