转基因水稻BPL9K-2事件特异性检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 崔帅

作者： 崔帅;王作平;于江辉;肖国樱

作者机构：

关键词： 转基因水稻;旁侧序列;事件特异性检测;基因型鉴定

期刊名称： 中国生物工程杂志

ISSN： 1671-8135

年卷期： 2018 年 11 期

页码： 32-41

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用hiTAIL-PCR(high efficient thermal asymmetric interlaced PCR)法扩增获得了转基因水稻BPL9K-2的外源基因插入位点的左旁侧序列450bp,与水稻参考基因组数据比对发现其左边界插入在水稻基因组第10号染色体短臂的1 037 765位核苷酸残基之后。根据水稻参考基因组序列和外源基因右边界序列,设计引物扩增得到485bp的特异片段,通过数据库比对发现其右边界插入在水稻基因组第10号染色体短臂的1 037 825位核苷酸残基之前。因为外源基因插入和非正常重组,水稻基因组上缺失了59个核苷酸。基于左右旁侧序列,建立了转基因水稻BPL9K-2的事件特异性定性PCR检测方法,可以分别扩增到片段大小为449bp和485bp的特异条带。该方法特异性好,灵敏度高,能够在BPL9K-2基因组DNA相对含量为0. 1%的模板中检测出转基因成分。依据旁侧序列,建立了快速鉴定转基因后代植株外源基因型的三引物PCR检测方法。这些方法的建立,为转基因水稻BPL9K-2的应用和检测提供了技术支持。

分类号： S511

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