利用宏基因组文库筛选草甘膦不敏感的5-烯醇式丙酮莽草酰-3-磷酸合酶(EPSPS)基因

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陆伟

作者： 陆伟;梁爱敏;孟秀萍;顿宝庆;金丹;穆文超;林敏

作者机构：

关键词： 宏基因组;5-烯醇式丙酮莽草酰-3-磷酸合酶(EPSPS);草甘膦

期刊名称： 高技术通讯

ISSN： 1002-0470

年卷期： 2006 年 16 卷 012 期

页码： 1284-1288

收录情况： EI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 为探索利用宏基因组文库筛选草甘膦不敏感的5-烯醇式丙酮莽草酰-3-磷酸合酶(EPSPS)基因,直接从土壤中提取细菌DNA,构建草甘膦污染土壤细菌宏基因组文库,并利用EPSP合酶缺失突变株ER2799筛选到4个能互补EPSP合酶功能的克隆,其中两个克隆的转化子能够在含5MMOL/L草甘膦的MOPS培养基上生长.测序结果表明它们均含有完整的EPSP合酶编码基因,GT-1AROA核苷酸长度为1335BP,编码445个氨基酸,GT-4AROA核苷酸长度为1350BP,编码450个氨基酸.利用PCR方法将两个基因克隆到原核表达载体PET28A上后,可以使宿主细胞BL21(DE3)在含100MMOL/L草甘膦的MOPS培养基中良好生长.上述结果表明,利用宏基因组文库筛选方法可以得到高抗草甘膦的EPSPS基因.

分类号： O6

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