响应面法优化紫贻贝免疫活性肽的制备工艺

文献类型: 中文期刊

第一作者: 于莹

作者: 于莹;宿小杰;周德庆;刘楠;孙永;王珊珊

作者机构:

关键词: 紫贻贝;免疫活性肽;响应面法;RAW264.7巨噬细胞

期刊名称: 中国海洋药物

ISSN: 1002-3461

年卷期: 2021 年 006 期

页码: 21-29

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 目的探讨紫贻贝免疫活性肽的酶解制备工艺。方法本研究以紫贻贝(Mytilus edulis)为原料,选用5种不同的蛋白酶对其进行酶解,以小鼠RAW264.7巨噬细胞的相对增殖率和酶解液中活性肽的浓度为指标,在单因素实验基础上通过响应面法优化制备紫贻贝免疫活性肽(Mytilus edulis immunomodulatory peptides, MIP),同时采用CCK-8和中性红吞噬实验对其免疫活性进行初步研究。结果实验数据表明,胰蛋白酶为最适蛋白酶,最佳酶解条件为:酶解温度43.7℃,p H 8.9,时间3.2 h,加酶量3 000 U/g。在此条件下,100μg/mL MIP对RAW264.7巨噬细胞的相对增殖率为92.4%。CCK-8结果显示,MIP对RAW264.7细胞无毒性作用且能显著促进细胞增殖。当MIP浓度为100μg/mL时,中性红吞噬指数可提高至1.22。同时,形态学观察结果显示MIP可以刺激细胞分化形成伪足,细胞形态以不规则多边形为主。结论 MIP对RAW264.7细胞具有较好的免疫调节活性。

分类号: TS254.1

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