银狐生长激素cDNA克隆和原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘玉堂

作者： 刘玉堂;胡晓航;闫丽辉;曹殿军;刘培欣;杨传平

作者机构：

关键词： 银狐;生长激素;克隆;原核表达

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2008 年 35 卷 04 期

页码： 27-31

收录情况： 北大核心

摘要： 为了获得重组的银狐生长激素,本试验用Trizol的方法从银狐脑垂体组织中提取总RNA,以mRNA为模板,用RT-PCR方法扩增出生长激素成熟cDNA片段并克隆到载体质粒pMD18-T中;通过含有BamHⅠ酶切位点的特异引物从pMD18-T-fGH中亚克隆出cDNA片段,并将其重组到pPROEXTMHta质粒中,构建了银狐生长激素原核表达质粒pPRO-EXTMHta-fGH。将pPROEXTMHta-fGH原核表达质粒转化DH5α大肠杆菌,用终浓度1 mmol/L IPTG进行诱导,通过SDS-PAGE进行检测。结果表明在转化的大肠杆菌中检测到分子量为26 kD的fGH蛋白的存在,表达量占菌体蛋白总量的35%,并且表达产物以包涵体的形式存在。

分类号： S865.23

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