马铃薯SSR标记多重PCR反应体系优化研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王绍鹏

作者： 王绍鹏;刘尚武;李勇;刘伟婷;吕典秋

作者机构：

关键词： 马铃薯;SSR标记;多重PCR反应体系;优化

期刊名称： 东北农业大学学报

ISSN： 1005-9369

年卷期： 2010 年 41 卷 10 期

页码： 17-23

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以马铃薯品种克新18为试验材料,探讨了多重PCR反应体系主要成分、引物不同比例关系及退火温度对SSR标记扩增的影响。在不改变其他成分浓度的条件下,对PCR反应体系的4个组分(Taq酶、MgCl2、模板DNA、dNTPs)进行浓度或用量梯度试验;利用正交设计L(934)对反应体系的4对引物组合(STM0014、Pat、SSI、UGP)在3个水平上进行优化;最终确立了马铃薯SSR标记多重PCR反应优化体系,总体积为20μL;2.5μL 25 mmol.L-1 MgCl2,0.6μL 10 mmol.L-1 dNTPs,Taq酶0.8 U,模板DNA 80 ng;4 mmol.L-1的4对引物之间的用量比为2:1:2:3,退火温度为54.7℃。优化后的反应体系重复性好,扩增结果稳定可靠,能够明显区分不同的马铃薯品种。为进一步探讨马铃薯品种资源遗传多样性、构建DNA指纹图谱打下了坚实的基础。

分类号： S532

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