卷丹百合LlARF12基因的克隆、表达及功能分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李佳敏

作者： 李佳敏;王梦迪;梁佳惠;张铭芳;杜运鹏;张秀海;李玉舒;于晓南

作者机构：

关键词： 卷丹百合;珠芽;LlARF12基因;表达分析;病毒介导的基因沉默

期刊名称： 河南农业大学学报

ISSN： 1000-2340

年卷期： 2024 年 58 卷 002 期

页码： 205-217

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]探究卷丹百合珠芽发生前细胞和组织学层面的变化,讨论卷丹百合珠芽发生的内在机制.克隆生长素响应因子基因LlARF12,为解析LlARF12基因在卷丹百合珠芽发生过程中的作用机制提供参考.[方法]利用石蜡切片的方法对卷丹百合珠芽器官形成前的叶腋部位进行了组织学观测,从卷丹珠芽形成过程的转录组中筛选得到参与珠芽发生的关键基因LlARF12,克隆得到其编码区(CDS)序列,利用生物信息学软件对其进行分析预测,通过qRT-PCR对不同时期、不同种与品种的百合组织中的LlARF12基因进行表达模式分析,并通过VIGS技术对卷丹种球进行LlARF12基因沉默,从而验证其基因功能.[结果]克隆获得LlARF12基因长度为2 346 bp,编码781个氨基酸;qRT-PCR结果显示,LlARF12在珠芽发生的小白点时期表达量显著低于未发生珠芽时期、在S1时期植株茎秆上部表达量显著低于茎秆下部、在能够自然发生珠芽的百合品种中表达量显著低于其他百合品种;沉默LlARF12基因导致卷丹珠芽发生时间提前,且发生的珠芽数量增多.[结论]在卷丹百合珠芽发生的S1时期之前,腋生分生组织已经开始启动,此处靠近表皮的薄壁细胞层数增加、细胞核堆积,并且逐渐产生成熟的维管组织.LlARF12在卷丹百合不能发生珠芽的组织部位和时期的表达量普遍更高,推测其在珠芽发生过程中可能发挥转录抑制作用,通过VIGS技术进行的基因功能验证证明了LlARF12对珠芽发生的抑制作用.

分类号： S68

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