牛Oct4基因克隆及其逆转录病毒表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈冬梅

作者： 陈冬梅;吕长荣;辛晓玲;窦忠英

作者机构：

关键词： Oct4基因;克隆;逆转录病毒载体pMSCV;牛

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1674-7968

年卷期： 2010 年 18 卷 03 期

页码： 124-130

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了克隆奶牛Oct4基因开放性阅读框全序列,并建立高效、稳定产生逆转录病毒质粒pMSCV-Oct4的包装细胞株。我们以50～60日龄的胎牛原始生殖嵴为材料,用RT-PCR的方法扩增出牛Oct4基因全序列,全长为1083bp与GenBank公布的序列的同源性为99.4%。将其插入到逆转录病毒载体pMSCVneo的多克隆位点,获得重组逆转录病毒质粒pMSCVneo-Oct4。鉴定正确后,通过Lipofectamine2000将其转导入包装细胞PT67,用含有G418的培养液进行抗性筛选,获得阳性细胞克隆。细胞上清经过RT-PCR、透射电镜及病毒滴度测定等方法鉴定,证实所包装病毒存在,其滴度值为8.83×107cfu/mL。试验结果表明我们已获得携带牛Oct4基因的高滴度感染性逆转录病毒。

分类号： S823`Q78

  • 相关文献

[1]蒙古牛BMPR-IB基因部分cDNA的克隆和序列分析. 董文杰,王峰,刘永斌,田春英,刘美霞,荣威恒. 2007

[2]牛GDF-9基因的克隆与组织表达的分析. 田蕾,刘永斌,王峰,田春英,刘美霞,达赖,祁云霞,董文杰,荣威恒,孙洪深. 2007

[3]牛BMP-15基因cDNA的克隆和序列分析. 祁云霞,王峰,刘永斌,田蕾,董文杰,达赖,田春英,荣威恒. 2007

[4]用RACE技术扩增并克隆牛BMP4基因3′端序列. 刘永斌,王峰,田春英,达赖,荣威恒,郭建平. 2006

[5]口蹄疫病毒诱导的牛α-干扰素基因cDNA的克隆及序列分析. 李冬,刘在新,王超英,谢庆阁. 2003

[6]牛1gG高亲和力受体的分子克隆及序列分析. 阎玉河,李学伍,王爱萍,张改平. 2000

[7]牛BMP4基因部分cDNA的克隆和序列分析. 王峰,刘永斌,荣威恒,裴永志. 2005

[8]牛GDF5基因启动子的克隆与序列分析. 刘永峰,昝林森,赵栓平,亐开兴,李林强,张莺莺,唐中林,杨述林,牟玉莲,崔文涛. 2010

[9]牛输卵管上皮细胞转人胶原蛋白cDNA基因及转基因克隆胚胎. 吕自力,王亮,刘婷婷,石国庆. 2012

[10]牛Dmrt7基因cDNA的克隆和生物信息学分析. 淮亚红,许尚忠,姬爱国,王淑辉,高雪,陈金宝,任红艳. 2008

[11]家畜胚胎克隆关键技术及应用研究. 宋雪莹,佟桂芝,宋斌,李平,刘德会,李玉龙,丁丽艳,李同豹. 2020

[12]牛MED28基因编码区克隆、生物信息学分析及组织表达谱研究. 李晋男,王亚慧,邓天宇,梁忙,杜丽丽,李柯安宁,薛青青,骞里,高雪,张路培,朱波,陈燕,王泽昭,李俊雅,高会江. 2024

[13]牛趋化因子受体4基因的克隆表达及序列分析. 李小庆,何延华,陈国华,房永祥,冯海燕,赵娜,景志忠. 2009

[14]荷斯坦奶牛中性粒细胞β-防御素cDNA的克隆与序列分析. 刘双龙,王长法,杨宏军,杨少华,阿合买提·买买提,高运东,仲跻峰. 2007

[15]牛PDGFRA基因克隆及过表达载体构建的研究. 高一,吕阳,刘理想,张国梁. 2019

[16]牛α-actinin1基因的克隆及其多态性与繁殖性状的关联分析. 淮亚红,许尚忠,王淑辉,高雪,陈金宝,任红艳. 2008

[17]威宁牛及其杂交牛生产性能的比较研究. 张纯新,刘镜. 2015

[18]牛体外性控胚胎的移植效果观察. 郑新宝,刘宏,陈静波,蒋晓新,丁凤,孙杰敏,于明. 2011

[19]新疆部分地区牛新孢子虫病的血清学调查. 徐雪平,陈志蓉,薄新文,Dieter Palmer. 2002

[20]牛sox2基因的克隆及重组反转录病毒载体的构建. 辛晓玲,吕长荣,陈冬梅,窦忠英. 2009

作者其他论文 更多>>

微信小程序