罗非鱼肝脏中超氧化物歧化酶的提取、纯化与分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 吴燕燕

作者： 吴燕燕;李来好;郝志明;岑剑伟;陈胜军;周婉君;杨贤庆;刁石强

作者机构：

关键词： 奥尼罗非鱼;肝脏;超氧化物歧化酶;加热法;纯化

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2007 年 31 卷 04 期

页码： 518-524

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以奥尼罗非鱼肝脏为原料,研究加热法提取超氧化物歧化酶(SOD)的工艺条件,丙酮沉淀回收酶法和HitrapTMQ FF阴离子柱纯化Cu,Zn-SOD,并对其酶学性质进行分析。结果表明加热法提取SOD时,在缓冲液中加入10mmol.L-1CuCl2,调节pH为5.6,65℃进行加热处理,可以提高SOD粗酶的稳定性和得率,其得率为57%,粗酶比活为(2580±6)U.mg-1。对酶的酶学性质研究表明纯化后SOD比活为(4895±2)U.mg-1,SDS-PAGE电泳为单一蛋白酶带,分子量为36ku,最大紫外吸收波长为265nm。该酶在pH6.0~9.0具有较好的稳定性,在75℃以下稳定,具有较好的耐热性。氰化钾、脲素、β-巯基乙醇、H2O2、对Cu,Zn-SOD具有明显的抑制作用;EDTA浓度小于3mmol.L-1时,对Cu,Zn-SOD活性有明显增强作用,EDTA浓度大于3mmol.L-1时,对Cu,Zn-SOD活性有抑制作用;DTT的修饰使Cu,Zn-SOD活性显著增加。为进一步研究和应用罗非鱼肝脏SOD提供了基础参数。

分类号： Q814.1

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