啤酒花潜隐类病毒的实时荧光RT-PCR检测

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郭立新

作者： 段维军;张祥林;邓丛良;闻伟刚;李世访

作者机构：

关键词： 啤酒花潜隐类病毒;实时荧光RT-PCR;检测;TaqMan-MGB探针

期刊名称： 植物病理学报

ISSN： 0412-0914

年卷期： 2012 年 42 卷 05 期

页码： 466-473

收录情况： 北大核心

摘要： 根据啤酒花潜隐类病毒(HpLVd)各分离物基因序列,设计并合成1对特异性引物和1条TaqMan-MGB探针,建立了对HpLVd的实时荧光RT-PCR检测方法。通过对反应体系的优化,确定了HpLVd的实时荧光RT-PCR最佳反应条件:Mg2+终浓度为5.5 mmol/L,引物终浓度为0.7μmol/L,探针终浓度为0.5μmol/L。灵敏度对比试验结果显示,实时荧光RT-PCR的灵敏度较普通RT-PCR通过琼脂糖凝胶电泳高10倍,在25μL反应体系中,总RNA含量达到20 pg就能通过实时荧光RT-PCR检测出来。此方法也能成功检测田间样品上的啤酒花潜隐类病毒。

分类号： S432.41

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