猪圆环病毒2b亚型Cap融合蛋白的原核表达及其免疫原性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李国秀

作者： 李国秀;欧云文;马炳;李茜;代军飞;丁耀忠;刘磊;张杰

作者机构：

关键词： 猪圆环病毒2b亚型;Cap蛋白;麦芽糖结合蛋白;可溶性表达;免疫原性

期刊名称： 中国生物制品学杂志

ISSN： 1004-5503

年卷期： 2021 年 001 期

页码： 38-42,47

收录情况： CSCD

摘要： 目的原核表达猪圆环病毒2b亚型（porcine circovirus subtype 2b,PCV2b）Cap融合蛋白,并分析其免疫原性。方法以PCV2毒株（CAU0673）基因组为参考序列,His-Sumo-PCV2b-Cap-pUC57重组质粒为模板,设计特异性引物,PCR扩增目的片段;将其产物克隆至pMAL-C4x载体中,构建pC4x-PCV2b-Cap重组质粒,转化至大肠埃希菌BL21（DE3）,IPTG诱导表达,表达产物进行直链淀粉树脂纯化。SDS-PAGE分析目的蛋白的可溶性,Western blot检测其反应原性;以纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,Western blot检测小鼠血清抗体特异性。结果经双酶切及测序鉴定,重组质粒pC4x-PCV2b-Cap构建正确;融合蛋白MBP-Cap（matlose binding protein Cap）最适诱导条件为1 mmol/L IPTG 37℃诱导6 h,其以可溶性形式存在,相对分子质量约为81 000,与PCV2b阳性猪血清、兔抗MBPtag多克隆抗体及免疫小鼠抗血清均可发生特异性反应。结论成功构建了pC4x-PCV2b-Cap重组表达载体,获得了可溶性的MBP-Cap蛋白,其纯化蛋白具有较好的免疫原性。本文为PCV2b诊断试剂盒的研发奠定了理论基础。

分类号： S852.651

  • 相关文献

[1]西尼罗病毒prM基因可溶性表达与抗原性鉴定. 赵晶,秦永丽,孙恩成,杨涛,徐青元,耿宏伟,王凌凤,蔡绪禹,魏鹏,王文世,步志高,吴东来. 2010

[2]PPV-VP2蛋白和PCV2-Cap蛋白二联亚单位疫苗的研究. 刘国阳,华涛,乔绪稳,唐波,常晨,侯继波,李锦春,张道华. 2018

[3]表达PCV-2 Cap和PPV-1 VP2蛋白的重组PRV的构建及鉴定. 谢永兴,夏德利,黄立平,危艳武,吴洪丽,朱红振,冯力,刘长明. 2019

[4]中和表位串联的PCV2b病毒样颗粒在昆虫细胞中的表达与鉴定. 任春晓,冯华,张腾,蒋敏,刘运超,金前跃,张改平. 2021

[5]利用E.coli表达猪圆环病毒2型Cap蛋白生产病毒样颗粒疫苗. 赵晓云,乔绪稳,陈瑾,李鹏成,于晓明,朱国强,郑其升,侯继波. 2015

[6]猪O型口蹄疫病毒细菌样颗粒疫苗的制备与免疫原性鉴定. 侯立婷,陈瑾,乔绪稳,于晓明,侯继波,郑其升,李槿年. 2017

[7]A型塞内卡病毒VP2蛋白多表位抗原免疫原性分析. 陶世宇,茹毅,陈娇,郝荣增,李亚军,卢炳州,石正旺,刘学荣,郑海学,魏彦明. 2023

[8]南非2型口蹄疫病毒VP1基因的原核可溶性表达及免疫原性分析. 李国秀,欧云文,丁耀忠,李茜,代军飞,刘磊,张杰. 2020

[9]猪圆环病毒2型Cap蛋白与猪O型口蹄疫病毒VPl蛋白在杆状病毒中共表达及鉴定. 王一平,郭龙军,唐青海,刘丹,危艳武,李胜斌,刘建波,黄立平,吴洪丽,刘长明. 2013

[10]猪圆环病毒3型Cap重组鞭毛蛋白融合表达及其免疫原性研究. 姜海军,王丹,郭禹,韦莉,侯磊,王菁,朱珊珊,刘爵. 2023

[11]抗鹅星状病毒Cap蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 孙佳卉,刘志艺,黄聪,李传峰,刘光清,陈宗艳. 2021

[12]猪圆环病毒2型Cap蛋白原核表达载体的构建、表达及蛋白纯化. 刘玉伟,辛长勋,孙盼盼,王硕,高梅,时建立,彭喆,吴晓燕,王永明,李俊. 2019

[13]猪圆环病毒2型去核定位信号ORF2基因的原核表达与初步应用. 苗丽娟,符芳,王小武,陈微晶,鲁晶红,李曦. 2008

[14]猪圆环病毒2型Cap蛋白原核可溶性表达及分析. 陈稳,郭军庆,王寅彪,金前跃,郅玉宝,王彦彬,张改平. 2013

[15]PCV3河南株Cap基因的克隆、测序及其在大肠杆菌中的表达. 郭奎,徐朋丽,赵宇,郑慧华,杨明凡,陈红英. 2018

[16]猪圆环病毒Ⅱ型单克隆抗体的制备及应用. 车勇良,周伦江,王隆柏,魏宏,陈少莺,陈如敬,庄向生. 2010

[17]PRRSVGP3蛋白和PCV-2Cap蛋白在杆状病毒囊膜表面的共展示及展示蛋白的小鼠免疫试验. 许信刚,张宽,王志昇,童德文. 2011

[18]猪圆环病毒2型Cap蛋白与猪O型口蹄疫病毒VP1蛋白在杆状病毒中共表达及鉴定. 王一平,郭龙军,唐青海,刘丹,危艳武,李胜斌,刘建波,黄立平,吴洪丽,刘长明. 2013

[19]猪圆环病毒2型间接ELISA方法的建立. 车勇良,庄向生,石运通,王隆柏,魏宏,陈如敬,吴学敏,周伦江. 2011

[20]猪圆环病毒2型Cap蛋白的原核表达、纯化及抗原性分析. 杨莹莹,刘永刚,郝立沙,王刚,涂亚斌. 2016

作者其他论文 更多>>

微信小程序