用proteinG纯化口蹄疫病毒单克隆抗体的特性分析

文献类型: 中文期刊

第一作者: 宋帅

作者: 宋帅;林彤;邵军军;丛国正;独军政;高闪电;常惠芸

作者机构:

关键词: O型口蹄疫病毒;单克隆抗体;链球菌G蛋白;亲和层析

期刊名称: 中国人兽共患病学报

ISSN:

年卷期: 2009 年 02 期

页码: 139-142

收录情况: CSCD

摘要: 目的为了获得高效价和高纯度的O型口蹄疫病毒单克隆抗体。方法用O型口蹄疫乳鼠毒(LD50=10-8.5)感染免疫小鼠,按有限稀释法和ELISA方法筛选出阳性杂交瘤细胞株,制备单抗腹水,所收腹水用50%和45%的饱和硫酸铵沉淀,再用proteinG亲和层析柱进行亲和层析纯化单体,并用SDS-PAGE和单抗检测方法分析其纯化抗体的纯度和活性。结果经3次亚克隆获得了一株杂交瘤细胞株(10E6),抗体亚类鉴定为IgG2a;SDS-PAGE电泳显示,纯化的抗体纯度较高,只有IgG2a的重链和轻链,而没有其它杂蛋白带;单抗ELISA检测方法显示,纯化的抗体具有良好的活性,其效价为1∶102400,高于腹水效...

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