猪δ冠状病毒与猪流行性腹泻病毒的受体结合区融合表达及免疫原性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 仝力心

作者： 仝力心;芦延珍;于瑞明;张莉萍;刘霞;王永录;杜晓华;刘新生

作者机构：

关键词： 猪德尔塔冠状病毒;猪流行性腹泻病毒;受体结构域;亚单位疫苗

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2024 年 007 期

页码： 2150-2161

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了研发出一种可同时预防猪德尔塔冠状病毒（porcine deltacoronavirus,PDCo V）和猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）两种病毒病的有效二联亚单位疫苗，本研究将PDCo V的受体结合域（receptor binding domain,RBD）与PEDV的RBD基因进行串联，构建至真核表达载体p CDNA3.1（+）中，利用哺乳动物细胞Expi CHOTM表达系统表达纯化出PDCo V-RBD-PEDV-RBD （简写为pd RBD-pe RBD）融合蛋白，以3种不同剂量（10、20和30μg）免疫小鼠，利用ELISA和流式细胞术评估该融合蛋白诱导的体液免疫反应和细胞免疫反应，利用病毒微量中和试验测定免疫小鼠血清对PDCo V或PEDV的中和效价。结果表明，3个不同剂量组在加强免疫后均诱发了高水平的Ig G抗体，不同剂量组间抗体水平没有明显差异，说明10μg的免疫剂量即可达到较好免疫效果。流式细胞术检测结果显示，免疫组的CD3+CD4+T细胞比例显著升高，CD3+CD8+T细胞比例相对较低，这符合亚单位疫苗主导机体产生体液免疫反应的预期。同时，对血清中细胞因子白细胞介素-2 （interleukin-2,IL-2）、白细胞介素-4 （interleukin-4,IL-4）和干扰素-γ （interferon-γ,IFN-γ）的含量进行了检测，结果表明该融合蛋白诱导了良好的体液免疫效果，同时还产生了一定的细胞免疫应答。中和试验结果表明，10μg免疫剂量所诱导的抗体即可在体外有效中和PDCo V和PEDV两种病毒，效价分别为1:179.25和1:141.21。上述研究结果表明，pd RBD-pe RBD融合蛋白10μg免疫剂量即可诱导高水平的体液免疫反应，诱导的抗体可同时中和PDCo V和PEDV两种病毒，说明pd RBD-pe RBD融合蛋白有希望成为一种能同时预防PDCo V和PEDV的有效二联亚单位疫苗。

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]2016-2018年天津地区规模化猪场猪主要病毒性腹泻病原的调查与分析. 路超,田向学,李富强,任卫科,郑丽,张莉,王利丽,鄢明华. 2019

[2]猪流行性腹泻病毒与新发腹泻病毒混合感染分析. 焦文强,邢广旭,徐引弟,王丽,王治方,王克领. 2021

[3]猪流行性腹泻病毒S蛋白外分泌信号肽筛选及稳定表达细胞系的构建. 王传红,宋旭,刘诗雨,张格格,徐红,王祎,赵永祥,郭荣利,范宝超,胡朝阳,李彬. 2024

[4]猪德尔塔冠状病毒RT-PCR检测方法的建立及应用. 郑丽,王利丽,路超,杨春蕾,李富强. 2017

[5]猪德尔塔冠状病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用. 江珊,李富强,李秀丽,王利丽,郑丽,张莉,路超,鄢明华. 2019

[6]猪德尔塔冠状病毒感染仔猪引起肠道组织病理学变化及其对致病相关因子的影响. 江珊,李秀丽,张莉,王利丽,李富强,路超,鄢明华. 2021

[7]适应肠道细胞的猪德尔塔冠状病毒对仔猪的致病性分析. 石迎,陶洁,李本强,程靖华,刘惠莉. 2024

[8]猪德尔塔冠状病毒BJ株的分离鉴定与致病性分析. 刘秋歌,王洪峰,范前进,冯力,陈建飞. 2020

[9]菊苣酸对仔猪人工感染猪德尔塔冠状病毒的保护效果研究. 谢永生,牛佳伟,李松倍,陈一波,李玉静,易宏波,贺东生. 2022

[10]国内首株猪德尔塔冠状病毒(Porcine deltacoronavirus)的分离鉴定. 陈建飞,王潇博,焦贺勋,时洪艳,张鑫,刘建波,石达,冯力. 2016

[11]猪德尔塔冠状病毒重组聚合酶扩增检测方法的建立与应用. 肖帅,刘新生,方玉珍,周鹏,张永光,王永录,魏彦明. 2019

[12]一例猪德尔塔冠状病毒病的诊断与防控. 赵海忠,李良华,宋忠旭,孙华,彭先文,梅书棋. 2019

[13]猪德尔塔冠状病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用. 肖帅,刘新生,方玉珍,周鹏,张巧玲,芦延珍,董昭良,张永光,王永录,魏彦明. 2017

[14]基于转录组测序技术分析猪德尔塔冠状病毒诱导IPEC-J2细胞中自噬相关的变化. 江珊,李秀丽,李富强,李程,陈建飞,张莉,任卫科,朱琪,冯力,鄢明华. 2023

[15]STAG2基因敲除的IPEC-J2细胞系构建及其对PDCoV复制影响的研究. 张洪玲,陈建飞,石照蓉,李明蔚,吴洋,郭龙军,冯力. 2022

[16]基于转录组测序技术分析猪德尔塔冠状病毒感染ST细胞机制的初步研究. 谢永生,张昆丽,张建峰,贺东生. 2024

[17]猪氨基肽酶N不是猪德尔塔冠状病毒入侵宿主细胞的受体. 卢曼曼,张家林,王洪峰,时洪艳,张鑫,袁婧,石达,刘建波,陈建飞,冯力. 2017

[18]国内首株猪德尔塔冠状病毒(Porcinedeltacoronavirus)的分离鉴定. 陈建飞,王潇博,焦贺勋,时洪艳,张鑫,刘建波,石达,冯力. 2016

[19]利用霍乱毒素B亚单位展示猪O型口蹄疫病毒VP1蛋白主要抗原表位. 李图帅,陈瑾,乔绪稳,汪浩,张元鹏,侯继波,郑其升,胡元亮. 2016

[20]江苏某牛场奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定、耐药性及保守抗原分析. 周明旭,左晓昕,徐悦,鲍熹,张金秋,杨章平,朱国强,卢宇. 2019

作者其他论文 更多>>

微信小程序