鲤mstn基因RNA干涉载体构建与检测分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 闫学春
作者: 闫学春;栾培贤;何立川
作者机构:
关键词: 鲤;MSTN;干涉载体;检测
期刊名称: 水产学杂志
ISSN: 1005-3832
年卷期: 2021 年 005 期
页码: 22-27
摘要: 肌肉生长抑制素(Myostation,MSTN)是影响肌肉生长的负调控因子,其缺失或突变会导致肌肉量的增加。本研究参照鲤(Cyprinus carpio)高通量转录组测序数据的拼接结果,筛选出针对mstn基因的si RNA序列(19bp保守同源序列),合成si RNA转录模板的发夹结构,构建包含斑马鱼(Danio rerio)U6启动子、干涉片段si MSTN和鲤mstn的供体质粒pzu6p-si MSTN。通过显微注射方法,获得一批转鲤mstn基因的转基因鲤。经PCR检测,转基因鲤mstn外源基因的平均整合率为36.2%,对其中5尾转基因阳性鲤的扩增产物进行回收、克隆和测序验证。结果表明:转基因阳性鲤中均含有转基因目的片段,说明鲤mstn基因RNA干涉载体可在鲤中实现基因整合,为进一步获得具有特殊功能的转基因鱼类提供新的方法。
分类号: S917.4
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