针对猪瘟病毒Erns基因实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王树茂

作者： 王树茂;王桂花;王安冉;周艳君;姜一峰;乔思娜;赵款;童光志;李丽薇;高飞

作者机构：

关键词： 猪瘟病毒;Erns基因;荧光定量PCR

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2023 年 53 卷 012 期

页码： 1488-1494

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立针对猪瘟病毒(CSFV)的快速诊断方法,根据猪瘟病毒石门强毒株(GenBank ID:AF092448.2)已公布的Erns基因序列设计并合成特异性引物及探针,建立针对Erns基因的TaqMan荧光定量PCR检测方法,验证其特异性、敏感性、重复性,并进行临床样品及重组病毒的检测.结果显示,建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法的Ct值与标准品在1×109~1×102copies/μL范围内具有很好的线性关系,相关系数为0.99,斜率为-3.661 5,检测下限为1.0×101copies/μL,与其他能引起相似临床症状的猪源病毒无交叉反应.重复性试验结果显示,组间与组内变异系数均小于2.925 02%,证实该方法重复性好.本方法适用于临床样品中CSFV抗原核酸的检测,同时也可以用于CSFV在细胞上增殖情况的检测和本实验室构建的表达CSFV Erns基因的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的鉴定及检测,对于临床上CSFV抗原检测、CSF诊断及CSFV的实验室研究有重要意义.

分类号： S852.659.6

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