猪繁殖与呼吸综合征病毒一步法多重RT-PCR检测方法的建立和应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王方洲

作者： 王方洲;张婧;马雪青;李平花;包慧芳;王健;赵志荀;李娇阳;李国秀;刘在新;卢曾军;曾巧英;孙普

作者机构：

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;一步法多重RT-PCR;建立;应用

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2022 年 52 卷 007 期

页码： 805-814

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为提高实验室诊断猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的准确性,本研究分析了近几年国内流行的PRRSV毒株序列,针对主要流行的美洲型和欧洲型毒株设计合成特异性引物,建立PRRSV 一步法多重RT-PCR检测方法,通过特异性、敏感性和重复性试验,与实时荧光RT-PCR对比检测田间样品,评价该方法的检测能力.结果显示,本研究筛选出了3对特异性引物,成功建立了PRRSV一步法多重RT-PCR检测方法,扩增目的片段大小分别为408bp、548 bp、689 bp,至少扩增出任意一条特异性条带即可判为阳性;对口蹄疫病毒、猪瘟病毒、塞内卡病毒、非洲猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒均无特异性条带扩增;检测美洲型经典毒株VR-2332、高致病性毒株GSWW15株和NADC30样毒株GSWW18的最低病毒量范围为25~50TCID50/mL;45份田间临床样品的比对检测结果显示,本研究建立的多重RT-PCR检测方法检出阳性率为33.3%,与实时荧光RT-PCR方法的检测结果符合率为95.6%.结果表明,本研究建立的PRRSV一步法多重RT-PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,可用于PRRSV流行病学的调查,具有良好的应用前景.

分类号： S852.659.6

  • 相关文献

[1]5种猪病多重PCR检测方法的建立. 王隆柏,张志刚,苏永裕,车勇良,吴学敏,周伦江. 2014

[2]广东农业强省评价指标体系的建立及应用. 康艺之,万忠,方伟,林伟君. 2010

[3]鸭源NF-κB1基因荧光定量PCR方法建立及其初步应用. 张飘,贺欣薇,杨霞,曾茂芹,刘妍罕,张扬子,杨颖,温贵兰,程振涛,文明. 2021

[4]绵羊微卫星标记多重PCR体系的建立与应用. 赵中利,胡明月,刘正喜,闫守庆,马惠海. 2020

[5]基于JavaEE-Asp.net技术的蜜蜂种质资源信息数据库系统的建立与应用. 刘之光,吕丽萍,丁桂玲,郭海坤,秦岳,石巍. 2012

[6]甘肃省测土配方施肥专家系统的建立与应用. 吕晓东,杨虎德,王方. 2006

[7]组合预测模型在新疆农作物单产预测中的应用. 马永尚,庞祖光. 1993

[8]猪细小病毒和猪圆环病毒2型多重PCR检测方法的建立与应用. 樊振华,王娟萍,孟帆,吴忻,刘文俊,米瑞娟,姚敬明,程海龙. 2012

[9]鸡黄病毒RT-PCR检测方法的建立. 王劭,陈仕龙,陈少莺,程晓霞,林锋强,朱小丽,江斌,李兆龙. 2012

[10]马泰勒虫病PCR检测方法的建立和应用. 罗金,刘光远,谢俊仁,田占成,党根生. 2012

[11]棉花阶梯式复交育种方法的建立与应用. 詹先进,蓝家样,陈全求,黄云,符家平. 2011

[12]一步法多重RT-PCR检测猪圆环病毒2型和猪繁殖与呼吸道综合征病毒. 王英,周宗清,张春玲,何锡忠,张婉华,李春华,蒋凤英,邹勇. 2008

[13]农业科技档案安全保护体系的建立. 魏东,李霞. 2013

[14]甘薯DNA提取及ISSR反应体系的建立. 宋吉轩,王季春,雷尊国,黄团. 2010

[15]家庭农场植保社会化服务体系的建立和完善. 沈素文. 2016

[16]贵州茶树种质资源数据库的建立. 田永辉,梁远发,罗显扬,龙明树,周国兰,鄢东海. 2007

[17]农业科技档案安全保护体系的建立. 魏东,李霞. 2013

[18]温州城市绿化有害生物风险评估模型的建立及几种有害生物的风险评估. 刘又高,金可仲,党向利,柴一秋,金轶伟,陈官菊,厉晓腊. 2012

[19]浅议新疆家庭牧场资源优化配置管理模型的建立. 丛英利,谈锐,陈琴. 2014

[20]隐性核不育两系杂交油菜制种基地的建立与规范管理. 曾兵,林卫红,代文东,黄泽素,饶勇. 2018

作者其他论文 更多>>

微信小程序