PCV2衣壳蛋白肽段的表达及其血清抗体间接ELISA检测方法

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨顺利

作者： 杨顺利;尹双辉;尚佑军;沈小燕;刘湘涛

作者机构：

关键词： 圆环病毒2型;可溶性表达;ELISA;抗体检测

期刊名称： 西北农业学报

ISSN： 1004-1389

年卷期： 2011 年 20 卷 01 期

页码： 1-7

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用可溶性重组PCV2-Cap蛋白肽段为抗原,建立PCV2血清抗体间接ELISA诊断方法(rhcap-ELISA)。将PCV2cap基因中含主要表位的片段克隆到表达载体pGEX-6p-1上,转化E.coli,降低诱导温度至18℃诱导,获得大小为34 ku的可溶性融合蛋白。Western blotting试验证实该融合蛋白具有很强的免疫学活性,通过亲和层析柱对可溶性蛋白进行纯化。用融合表达的可溶性蛋白肽段作为抗原,建立猪圆环病毒(PCV2)血清抗体间接ELISA诊断方法。该方法的交叉反应结果表明,重组抗原与PRRSV、CSF、PPV和PRV阳性血清之间不存在交叉反应;用rhcap-ELISA和商品化的同类试剂盒(PCV2-Ab-Kit)检测137送检血清样品,2种试剂盒的阳性检测率分别为79.56%和83.21%。因此,rhcap-ELISA猪圆环病毒抗体检测试剂盒具有良好的敏感性和特异性,适合于在大规模的PCV2血清抗体的检测工作中使用。

分类号： S858.28

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