葡萄扇叶病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 周俊

作者： 周俊;范旭东;董雅凤;张尊平;胡国君;任芳;李正男

作者机构：

关键词： 葡萄;葡萄扇叶病毒;实时荧光定量RT-PCR;病毒浓度

期刊名称： 园艺学报

ISSN： 0513-353X

年卷期： 2016 年 43 卷 03 期

页码： 538-548

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据葡萄扇叶病毒(Grapevine fanleaf virus,GFLV)RNA2序列设计4对特异性引物,通过引物筛选、体系优化,建立了以FL-HP1-F/R为引物的GFLV的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR方法。该方法标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,扩增效率为100%,相关性系数为0.998,灵敏性分别是常规RT-PCR和巢式RT-PCR的100倍和10倍。重复性试验表明组内和组间变异系数均小于2.59%,显示该方法具有较好的检测稳定性。内参基因的稳定性测试结果表明葡萄EF1和GAPDH基因具有较好的试验稳定性。利用建立的荧光定量方法测定12个葡萄样品中GFLV含量,并检测58个葡萄样品,结果表明不同葡萄样品中GFLV含量差异较大,最高含量是最低含量的81 245.5倍,与ELISA和巢式RT-PCR相比,实时荧光定量方法能检测出更多的GFLV分离物。

分类号： S436.631.19

  • 相关文献

[1]葡萄病毒A实时荧光定量RT-PCR检测技术的建立及应用. 任芳,董雅凤,张尊平,范旭东,胡国君. 2018

[2]葡萄病毒A实时荧光定量RT-PCR检测技术的建立及应用. 任芳,董雅凤,张尊平,范旭东,胡国君. 2018

[3]应用实时荧光定量RT-PCR高效检测葡萄病毒B. 任芳,张尊平,范旭东,胡国君,张梦妍,董雅凤. 2019

[4]葡萄蚕豆萎蔫病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法及应用. 张梦妍,张尊平,任芳,胡国君,范旭东,董雅凤. 2020

[5]FMDV在BHK_(21)细胞扩增后FMDV140S抗原的测定. 何建新,李德珍,韩福祥,李树春. 1993

[6]家蚕中肠型脓病发病规律的研究——Ⅴ.CPB的浓度和毒力对蚕的感染进程、发病时间分布和混育传播力的影响. 黄可威,陆有华. 1988

[7]重组型大豆花叶病毒河北分离物序列特征及侵染性. 林静,杨永庆,侯文焕,杨春燕,谢令琴,智海剑,张孟臣. 2015

[8]间接酶联免疫吸附试验检测葡萄扇叶病毒的研究和应用. 郭德银,李知行,蔡文启. 1991

[9]GFLVCP基因RNAi载体构建及其在转基因烟草中的干涉效果. 田莉莉,牛良. 2014

[10]利用RT-PCR检测葡萄扇叶病毒的研究. 何水涛,周厚成,张亚冰,郭卫东. 2001

[11]GFLV CP基因RNAi载体构建及其在转基因烟草中的干涉效果. 田莉莉,牛良. 2014

[12]草原红牛不同组织雄激素受体基因表达量检测及比较研究. 秦立红,刘伟英,张丽颖,张金玉,张国梁,赵玉民,张嘉保,赵志辉. 2010

[13]鸭坦布苏病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量检测方法的建立. 万春和,朱海侠,施少华,黄瑜,程龙飞,傅光华,陈红梅. 2013

[14]鸭坦布苏病毒SYBR GreenI实时荧光定量检测方法的建立. 万春和,朱海侠,施少华,黄瑜,程龙飞,傅光华,陈红梅. 2013

[15]牛Th1/Th2型细胞因子实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用. 韩猛立,蔡日鹏,黄新,何延华,薄新文. 2011

[16]牛Toll样受体实时荧光定量PCR检测方法的建立. 韩猛立,黄新,何延华,宋天增,薄新文,钟发刚. 2011

[17]在水稻纹枯病菌菌核形成中5个基因的表达差异分析. 王伟,杨惠,王政逸,陈卫良. 2013

[18]马铃薯Y病毒实时荧光定量RT-PCR检测体系的建立及应用. 李玉琦,李秋丽,王雅丽,黄珊珊,胡超,肖婉露,黄雅敏,赵鹏飞,黄伟. 2020

[19]高温胁迫下B型烟粉虱热激蛋白基因hsp70表达量的变化. 谢明,万方浩. 2007

[20]应用实时荧光定量RT-PCR检测几种食用菌蛋白抗烟草花叶病毒的活性. 廖芳,严红,赵素芳,李兴红. 2010

作者其他论文 更多>>

微信小程序