猪圆环病毒2型orf2基因在奶山羊胎儿成纤维细胞中的表达与生物活性鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 高珊

作者： 高珊;申培磊;侯书宝;徐洪龙;卢清侠;张勇;张改平

作者机构：

关键词： 猪圆环病毒;乳腺表达载体;转染;奶山羊;胎儿成纤维细胞

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2017 年 37 卷 09 期

页码： 1653-1658

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获得稳定表达猪圆环病毒2型(PCV-2)orf2基因的奶山羊胎儿成纤维细胞,将PCV-2 orf2基因与筛选基因neo表达框串联插入到pBC1质粒,得到重组的真核表达载体pBC1-orf2-neo。然后采用脂质体介导法将重组质粒转染至奶山羊胎儿成纤维细胞(gFFs),经G418筛选获得具有稳定抗性的阳性gFFs细胞株。RT-PCR分析显示,在获得的阳性gFFs细胞株中能够扩增出689bp的orf2基因和1 953bp的neo表达框,与预期结果相符。Western blot分析显示,获得了约37 000的表达产物,且能够与兔抗PCV-2Cap蛋白抗体发生反应。结果表明,orf2基因成功整合到山羊胎儿成纤维细胞染色体上并能够正确表达,表达产物具有良好的反应原性,这为构建分泌Cap蛋白的奶山羊乳腺生物反应器奠定了理论和物质基础。

分类号： S852.651

  • 相关文献

[1]电穿孔法转染猪胎儿成纤维细胞条件优化. 张庆晓,王慧利,孟春花,王锋,曹少先. 2012

[2]同源重组敲除MSTN基因的猪胎儿成纤维细胞的构建. 李景芬,于浩,袁野,刘娣. 2009

[3]福建白兔胎儿成纤维细胞分离培养和鉴定. 陈冬金,王锦祥,孙世坤,陈岩锋,桑雷,谢喜平. 2020

[4]利用启动子缺陷型打靶载体敲除五指山小型猪GGTA1基因. 郑道山,冯冲,朱彦宾,龙川,冯书堂,潘登科,马文丽. 2011

[5]体细胞克隆制备肌肉生长抑制素(Myostatin)基因敲除猪. 李鸿辉,冯冲,王宁,闫军,龙川,郑道山,李西睿,罗学明,朱彦宾,潘登科. 2010

[6]体细胞核移植生产转ω-3脂肪酸去饱和酶基因(sFat-1)的猪胚胎. 冯冲,周艳荣,龙川,刘晓,陈红星,潘登科,杨博辉. 2009

[7]转K2.9基因绒山羊体细胞核移植技术体系的优化研究. 潘晓燕,于永生,刘晓辉,王正朝,王晓阳,朴庆林,张立春,金海国. 2012

[8]绵羊胎儿成纤维细胞不同处理对核移植重构胚发育的影响. 王海,敖红,潘求真,李荣旗,赵孟彬,连正兴,李宁,吴常信. 2006

[9]奶山羊传染性角膜结膜炎的诊治. 杨斌,凤英,达来宝力格,张月梅,宋爱军,陈伟,兰天驰,金海,赵世华. 2015

[10]日粮不同NFC/NDF比对奶山羊血液参数的影响. 胡红莲,刘大程,卢德勋,珊丹,李胜利. 2008

[11]奶山羊繁殖期管理技术. 李蕴华. 2013

[12]十二指肠灌注大豆小肽和氨基酸对奶山羊小肠肽吸收的影响. 王玲,刘辉,李胜利,赵胜军,王立斌,杨再俊. 2010

[13]黄花蒿提取物对奶山羊乳腺动静脉血脂肪酸组成的影响. 王丽芳,卢德勋,高民,牛文艺. 2011

[14]不同NFC/NDF比日粮对奶山羊瘤胃pH动态变化的影响. 胡红莲,卢德勋,刘大程,石岩,珊丹. 2009

[15]日粮不同NFC/NDF比对奶山羊瘤胃pH、挥发性脂肪酸及乳酸含量的影响. 胡红莲,卢德勋,刘大程,珊丹,李胜利. 2010

[16]体外法研究pH与脂多糖或组胺的交互作用对奶山羊瘤胃上皮细胞紧密连接蛋白mRNA表达量的影响. 孙燕勇,高民,徐明,宋利文,李洋,李超,陈利青,胡红莲. 2018

[17]干扰PTEN基因对奶山羊乳腺上皮细胞脂质合成相关基因的转录及脂肪酸组成的影响. 姚大为,马静,陈丽丽,王添祯,孙欢,宋文芹,马毅. 2020

[18]miR-92a对奶山羊乳腺上皮细胞增殖及凋亡的调控分析. 包黎娟,刘育含,马毅,安小鹏,张月,张梦,王建刚,堵斌,李广,曹斌云. 2020

[19]十二指肠大豆小肽梯度灌注对泌乳奶山羊血液指标、乳成分及肽转运载体在小肠中表达丰度的影响. 刘辉,王玲,李胜利,王立斌. 2009

[20]甘氨酸对奶山羊乳腺炎性应答的调节及其作用机制研究. 杜瑞平,云伏雨,张兴夫,宋利文,高民. 2019

作者其他论文 更多>>

微信小程序